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1506年7月，英格兰国王亨利七世致信教皇尤里乌斯二世，表达了对意大利局势的关切，并表示愿意配合教皇的行动，为其提供资助并承诺不会在没有得到教皇允许的情况下进攻法国，作为拉拢盟友的代价，亨利七世也提出了一点小要求，其中一条是提名英格兰驻教廷使节克里斯托弗·班布里奇为枢机主教，这不算难以接受，教皇同意了。
除此之外，马克西米利安一世的女儿，前阿斯图里亚斯亲王妃和前萨伏伊公爵夫人奥地利的玛格丽特开始在意大利活动，宣扬威尼斯的威胁并以她的个人魅力拉拢支持者，对此感到威胁的威尼斯曾经试图通过向教皇归还部分市镇以寻求和解，尤里乌斯二世慨然笑纳，但并没有做出缓解威尼斯焦虑的实质举动。
见此困境，威尼斯曾经试图向英格兰求助，但亨利七世再度重申了支持教皇的立场，这令尤里乌斯二世感到满意，他批准了克里斯托弗·班布里奇的枢机主教任命。8月，尤里乌斯二世正式对威尼斯颁布集体绝罚令，宣称“若不使你们成为原本那样的卑贱渔民，我绝不会罢休”，对此，威尼斯使节的回应是“神父，若您不自检点，我们能更容易让您成为一个小小的教士”，但行动上，他们仍积极备战，他们清楚此次的危机不同以往。
1507年2月，路易十二正式率军南下，于次月强渡阿达河，在阿尼亚德洛地区大败威尼斯，一扫昔年狼狈撤离那不勒斯时的颓势，同时马克西米利安一世也率领帝国军队进驻曾被威尼斯侵吞的布雷西亚，威尼斯一时四面楚歌。而就在这个时候，马克西米利安一世的儿子，胡安娜女王的丈夫，卡斯蒂利亚国王兼勃艮第公爵腓力一世，在一次宴会后突发肠道疾病而死，死神的利爪平等地掐在每一个他想要带走的灵魂的脖颈上，他身为国王与公爵也没有什么不同。
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国王已经去世，而女王不肯让国王下葬，她甚至不相信国王已死。
她守在他的病床边，亲眼看着他在哀嚎中停止呼吸，他那美丽强健的躯体很快也会变得苍白僵硬，而她的灵魂似乎也被抽走了。她闭门不出，不理会正急迫地希望她出面主持大局的卡斯蒂利亚人，而腓力一世去世后王国里甚至没有一位能够帮助她决策的近亲。在这样的局面下，深受伊莎贝拉女王信任的托莱多大主教西斯内罗斯不得不为王国的未来打算了。
他再次回想起女王的遗嘱，深刻共情了女王的忧虑，并自认为了解了女王的用意：女人不能统治国家，哪怕是伊莎贝拉女王的女儿，或许女王的英明也是依赖丈夫的缘故，正因为深刻认识到了这一点，女王才会赋予丈夫在女儿被证实无力统治国家时摄政的权利，他毕竟是女王的父亲，他总比那群佛兰德斯人好，想起腓力一世那群侍从他便感到一阵头痛。
虽然斐迪南二世违背誓言再婚，但他毕竟还没有生下儿子，即便生下儿子，胡安娜女王也有女儿或孙女可以与之联姻，伊莎贝拉女王的血脉总是可以在卡斯蒂利亚和阿拉贡的王座上流传下去的。
当踞守那不勒斯的斐迪南二世收到托莱多大主教的信后，他终于露出满意的笑容：如果他执意留在卡斯蒂利亚争夺摄政权，那他再娶的事实会被反复提及，由此更无夺取摄政权的资本，倒不如让胡安娜和腓力在卡斯蒂利亚胡作非为，如他所料，胡安娜果然会把一切都搞砸的。
当伊莎贝拉最信任的忠臣都开始不相信胡安娜的统治能力后，他也到了可以回归卡斯蒂利亚的时候了。“胡安娜。”回到卡斯蒂利亚后，他立刻去见他的女儿，胡安娜女王披着黑纱，腹部已经高高隆起，她已经怀孕八个月了，看到父亲，她先是一阵茫然，而后立刻激动地跪在父亲脚下抓住他的衣摆，“啊，父亲，我很想念您......”
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